国产国拍亚洲精品永久69,国产国拍亚洲精品MV在线观看,国产国拍亚洲精品永久软件

    1. <label id="kyuw4"><samp id="kyuw4"></samp></label>

      1. <em id="kyuw4"><object id="kyuw4"></object></em>

        <del id="kyuw4"></del>
        <rp id="kyuw4"><object id="kyuw4"><blockquote id="kyuw4"></blockquote></object></rp>
        <dd id="kyuw4"><noscript id="kyuw4"></noscript></dd>
        <tbody id="kyuw4"></tbody>
        <rp id="kyuw4"><object id="kyuw4"><blockquote id="kyuw4"></blockquote></object></rp>
          產品編號: 產品名稱:    
        首 頁 關于我們 科研儀器 試劑耗材 技術資料 資訊中心 聯系我們 代理品牌
        • 由簡入繁,多種功能的移液平臺
        • YOKOGAWA 雙轉盤激光共聚焦高內涵成像分析系統CQ1
        • MultiNA微芯片電泳儀
        • MR SOLUTIONS 小動物核磁共振活體成像系統
        • 由簡入繁,多種功能的移液平臺
        • YOKOGAWA 雙轉盤激光共聚焦高內涵成像分析系統CQ1
        • MultiNA微芯片電泳儀
        • MR SOLUTIONS 小動物核磁共振活體成像系統
        試劑耗材
        實驗室耗材
        常規耗材
        自動化移液工作站耗材
        細胞培養
        組織及病理學
        冷凍系列—低溫處理
        移液處理系列
        酶標板系列
        果蠅實驗
        特殊細胞培養系統
        科研試劑
        二代測序
        Exosome
        GBI
        免疫磁珠系列
        微球系列
        科研儀器
        細胞生物學
        移液工作站
        活體影像系統
        酶標儀
        蛋白研究
        病理學研究
        分子生物學
        通用儀器
        診斷試劑研發
        cDNA基因過表達慢病毒包裝服務
        cDNA基因過表達慢病毒包裝服務
         
        一、慢病毒包裝服務介紹:       
         
          我們采用第三代慢病毒載體系統(慢病毒載體信息),病毒顆粒包膜上嵌合了來自水泡口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus)的VSV-G蛋白,使病毒能感染更多種細胞(包括分裂、非分裂細胞、難以轉染的細胞)、模式動物、活體實驗,且表達更趨穩定。
         
        慢病毒包裝簡要流程:
         
        1、根據目的基因相關信息構建cDNA過表達重組慢病毒載體,提取和純化成超純純化重組質粒;
        2、使用重組載體和病毒包裝質粒共轉染293TN 細胞,培養48 -72小時左右,進行病毒包裝和生產,收集病毒液;
        3、純化和濃縮病毒液;
        4、病毒滴度測定、目的基因檢定;
         
        高度安全:
         
          我們的慢病毒顆粒將生物安全性保證到了最大程度,其中HIV-1來源的pSIH系列shRNA慢病毒載體來源于能用于美國臨床基因治療的慢病毒, 專利號位美國Dr. J. G. Sodroski 的US patent #5,665,577 和 #5,981,276。
        ΔLTR (ΔU3)
        3’ LTR區域刪除了U3,使其不再有啟動/增強活性,成為自滅活(self-inactivating, SIN)載體,即整合到細胞基因組后,不會產生新的子代病毒,也降低了對周圍基因的意外激活。
        RSV/5LTR RSV雜交啟動子-R/U5長末端重復序列)
        采用雜合型RSV的增強子/啟動子-R/U5’長末端重復序列,這樣病毒轉錄時不依賴tat的存在,去除了 HIV的tat基因表達,tat在HIV-1基因組復制和轉錄延伸過程中發揮重要作用。
        慢病毒骨架設計
        僅保留了三個HIV-1病毒包裝、復制與轉導必需基因(gag, pol, rev) ,因其缺乏HIV­-1增強子啟動子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉錄出HIV RNA。
        慢病毒顆粒中無HIV-1基因
        因為HIV-1表達的包裝質粒都缺乏包裝信息,所以,慢病毒顆粒不具有復制能力。
        假病毒顆粒
        慢病毒顆粒實為假病毒顆粒,只表達目的基因。
        水皰性口炎病毒(VSV)糖蛋白G包膜
        限制慢病毒成為野生型的可能性。
         
        慢病毒轉染效率:
         
          MOI(Multiplicity of Infection,感染復數)是指每個細胞感染的病毒數,通常MOI越高,病毒整合到染色體的數量以及目的蛋白的表達量越高。 對于分裂活躍的細胞,比如Hela、293細胞,MOI=1時,80%以上的細胞均表達目的基因。而對于非分裂細胞,比如原代細胞,感染效率較低。我們建議通過比較不同MOI(比如0、1、5、10、50、100等),選擇適合的MOI進行實驗。
         
         
         
        二、我們的服務優勢:
         
        客制化載體構建方案:
         
          客制化載體構建方案包括根據目的基因特征, 以及要轉染細胞的特征與客戶需求,我們會為客戶選擇最合適的慢病毒載體、啟動子、熒光標記或選擇性抗性標記,插入目的基因使其過表達,客戶也可以根據我們的載體信息自行挑選;同時又可以根據客戶的需要,可在重組慢病毒載體中加入各種報告基因或標簽(或進行改造),從而構建高質量的cDNA過表達慢病毒載體,請參見cDNA過表達慢病毒載體構建服務。
         
        多種慢病毒載體系統可供選擇:
         
          我們用于cDNA過表達的慢病毒載體至少有三十種以上可供客選擇,根據參考文獻以及目的應用,我們總能幫客戶找到最合適實驗目的的載體系統,而且每種慢病毒載體都具有相應的文獻可追溯性(請參見慢病毒載體信息)。
         
        更合理、省心的服務流程:
         
          我們會根據每個客戶的情況,為客戶獨身定制相應的的服務流程,相比較而言,我們會根據客戶的實驗目的,查閱大量的文獻以作參考;大規模包裝之前,會先小試,再在細胞水平驗證目的基因, 并且會跟客戶確認,讓技術服務更合理;客戶只需要告訴我們目的序列信息和細胞信息,我們會完成所有的服務,最后也提供相應的數據和資料,讓客戶更省心。
         
        標準服務流程如下,僅供參考:
         
        慢病毒濃縮:
         
          我們使用SBI公司的PEG-it不會積累細胞殘片,避免了毒性和免疫反應,對包括ES細胞在內的所有靶細胞無毒。超速離心的過程中,也會濃縮其他雜質,如細胞碎片、膜片段、以及細胞培養基內的變性蛋白等。這些雜質對于病毒顆粒的后繼操作是有害的,如降低細胞轉染效率,對轉染細胞的細胞毒性等,特別是當轉染原代細胞的時候。同時應用于試驗動物的時候,會引發免疫反應,因此在慢病毒的應用過程中,不但需要較高的滴度,較高的純度也是很重要的。
         
         
        慢病毒包裝服務儲存計劃:
         
          我們會為客戶將定制好的慢病毒顆粒及載體做額外備份,免費儲存一段時間。以免客戶在后面的實驗中發生意外而急需。如有需要,也可以更優惠的價格再次訂購,詳情請參見慢病毒包裝服務儲存計劃。
         
        技術力量:
         
          我們的主要生產人員均為博士后或博士,我們生產人員常規包裝的慢病毒包裝顆粒滴度均在>10^9 IFUs/ml以上。
         
         
         
         
        三、cDNA過表達慢病毒包裝服務列表:
         
        cDNA過表達慢病毒包裝服務列表:
         
        編號
        慢病毒產量
        可提供慢病毒數量
        工作日
        P100001
        >1*10^7  IFUs/ml(常規滴度)
        >1*10^ 7~8 IFUs/ml
        30
        P100002
        >5*10^7 IFUs/ml(常規滴度)
        >5*10^ 7~8 IFUs/ml
        30
        P100003
        >1*10^8 IFUs/ml(高滴度)
        >1*10^ 8~9 IFUs/ml
        30
        P100004
        >2*10^8 IFUs/ml(高滴度)
        >2*10^ 8~9 IFUs/ml
        30
        P100005
        >4*10^8 IFUs/ml(高滴度)
        >4*10^ 8~9 IFUs/ml
        30
        P100006
        >1*10^9 IFUs/ml(超高滴度,體內實驗、干細胞應用)
        >1*10^ 9~10 IFUs/ml
        30
         
         
         
         
         
         
         
         
         
         
        說明:FIV來源的載體只能包裝成常規滴度的慢病毒
         
        對照慢病毒顆粒:
                             
        服務編號
        對照慢病毒產量
        可提供慢病毒數量
        P100007
        >1*10^7 IFUs/ml(常規滴度)
        >1*10^ 7~8 IFUs/ml
        P100008
        >1*10^8 IFUs/ml(常規滴度)
        >1*10^ 8~9 IFUs/ml
        P100009
        >1*10^9 IFUs/ml(超高滴度,體內實驗、干細胞應用)
        >1*10^ 9~10 IFUs/ml
         
         
         
         
         
         
         
        *說明:用RNAi病毒顆粒請見shRNA慢病毒包裝服務。
         
         
        四、成功案例與參考文獻:
         
        成功案例:
         
         
        參考文獻:
         
        1、Tomlinson JJ, Boudreau A, Wu D, Abdou Salem H, Carrigan A, Gagnon A, Mears AJ, Sorisky A, Atlas E, Haché RJ. Insulin sensitization of human preadipocytes through glucocorticoid hormone induction of forkhead transcription factors. Mol Endocrinol. 2010 Jan;24(1):104-13.
        2、Liu B, Peng XC, Zheng XL, Wang J, Qin YW. MiR-126 restoration down-regulate VEGF and inhibit the growth of lung cancer cell lines in vitro and in vivo. Lung Cancer. 2009 Feb 13. [Epub ahead of print].
        3、Zhang Q, Huang A, Lin YC, Yu HG. Associated changes in HCN2 and HCN4 transcripts and I(f) pacemaker current in myocytes. Biochim Biophys Acta. 2009 Feb 21.
        4、Thal D, Xavier CP, Rosentreter A, Linder S, Friedrichs B, Waha A, Pietsch T, Stumpf M, Noegel A, Clemen C. Expression of coronin-3 (coronin-1C) in diffuse gliomas is related to malignancy. J Pathol. 2008 Mar;214(4):415-24.
        5、Li W., Hardwick M., Rpsenthal D., Culty M., and Papadopoulos V. Peripheral-type benzodiazepine receptor overexpression and knockdown in human breast cancer cells indicate its prominent role in tumor cell proliferation. Biochemical Pharmacology 73 (4): 491-503, 2007.
        6、Sarojini H., Medepalli K., Terry D. A., Alphenaar B. W., and Wang E. Localized delivery of DNA to the cells by viral collagen-loaded silica colloidal crystals. BioTechniques® 43(2): Advanced Online Publication, 2007.
        8、Solomon S. Shaftel, Stephanos Kyrkanides, John A. Olschowka, Jen-nie H. Miller, Renee E. Johnson and M. Kerry O’Banion. Sustained hippocampal IL-1ß overexpression mediates chronic neuroinflammation and ameliorates Alzheimer plaque pathology. J. Clin. Invest., 117:1595-1604, 2007.
        9、Lee J.-J., Chen P. B., Yang S.-H., Cheng C.-H., Chueh L.-L., Pang V. F., Michael Hsiao M., Lin C.-T. Effect of the VP3 gene of chicken anemia virus on canine mammary tumor cell. American Journal of Veterinary Research 68 (4): 411-422, 2007.
        10、Seungjin Shin and Lonnie D. Shea. Lentivirus Immobilization to Nanoparticles for Enhanced and Localized Delivery From Hydrogels. Molecular Therapy (2010) 18 4, 700–706. PDF>>>
        11、Stefano Bartesaghi, Joanne Betts-Henderson, Kelvin Cain, David Dinsdale, Xiaoshan Zhou, Anna Karlsson, Paolo Salomoni1 and Pierluigi Nicotera. Loss of thymidine kinase 2 alters neuronal bioenergetics and leads to neurodegeneration. Hum Mol Genet. 2010 May 1;19(9):1669-77. PDF>>>
        12、Seungjin Shin, Hannah M. Tuinstra, David M. Salvay and Lonnie D. Shea. Phosphatidylserine immobilization of lentivirus for localized gene transfer. Biomaterials Volume 31, Issue 15, May 2010, Pages 4353-4359.
        13、Yonghui Zhang, Xiaojing Lin, Guoqin Wang, Jianfang Zhou, Jian Lu, Honglan Zhao, Fengwei Zhang, Jia Wu, Chunqiong Xu, Ning Du, Zi Li, Ye Zhang, Xiaoyi Wang, Shengli Bi, Yuelong Shu, Hongning Zhou, Wenjie Tan, Xiaobing Wu, Zhihui Chen, Yue Wang. Neuraminidase and Hemagglutinin Matching Patterns of a Highly Pathogenic Avian and Two Pandemic H1N1Influenza A Viruses. PLoS One. 2010; 5(2): e9167. PDF>>>
        14、Ning Sun, Nicholas J. Panetta, Deepak M. Gupta, Kitchener D. Wilson, Andrew Lee, Fangjun Jia, Shijun Hu, Athena M. Cherry, Robert C. Robbins, Michael T. Longaker, and Joseph C. Wu. Feeder-free derivation of induced pluripotent stem cells from adult human adipose stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 September 15; 106(37): 15720–15725. PDF>>>
        15、Pintchovski SA, Peebles CL, Kim HJ, Verdin E, Finkbeiner S. The serum response factor and a putative novel transcription factor regulate expression of the immediate-early gene Arc/Arg3.1 in neurons. J Neurosci. 2009 Feb 4;29(5):1525-37.
        17、Badri KR, Zhou Y, Dhru U, Aramgam S, Schuger L. Effects of the SANT domain of tension-induced/inhibited proteins (TIPs), novel partners of the histone acetyltransferase p300, on p, 300 activity and TIP-6-induced adipogenesis. Mol Cell Biol. 2008 Oct;28(20):6358-72.


        上海吉盛醫學科技有限公司--助力實驗室2.0時代!
        地址: 上海浦東張江高科技園區愛迪生路330號1樓
        聯系電話:021-61063990  傳真: 021-51370635  Email: info@genechem.com.cn
        ©版權所有 滬ICP備14040518號-1
           技術支持:上海網站制作公司 | 網站標題優化
        国产国拍亚洲精品永久69,国产国拍亚洲精品MV在线观看,国产国拍亚洲精品永久软件